大家好,来为大家解答以上问题。pcna抗体内参,内参抗体很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、 一.样本物种和属的来源:
2、 首先要考虑的是实验样本来自什么物种。
3、 1.哺乳动物组织或细胞样本通常包括-肌动蛋白、-微管蛋白、GAPDH、层粘连蛋白B、组蛋白H3、Na、Katpase等。
4、 2.对于植物来源的实验样本,可以选择plantactin、Rubisco等。
5、 3.对其他来源样本的研究较少,应参考文献报道,选择合适的蛋白质作为内参。
6、 二。目标蛋白质的分子量:
7、 当选择内参抗体,时,应该考虑目标蛋白的分子量。通常,目标蛋白和内部参照蛋白之间的分子量差异应该大于5KD。比如目标蛋白的分子量是45KD,就不适合选择-肌动蛋白作为内参。GAPDH或-微管蛋白可以考虑作为内部参照。
8、 三。目标蛋白的表达位点:
9、 就一般蛋白质检测而言,-肌动蛋白、-微管蛋白抗体等。都足够了,而对于核蛋白的定量,尤其是当样品蛋白是核蛋白时,选择合适的核蛋白内参更能体现内参的价值。常用的核内参抗体包括核纤层蛋白A、核纤层蛋白B、组蛋白H3,此外,其他常见的核蛋白内参包括PCNA、K70、K80等。在一些文献报道中,Erk2、TATA结合蛋白(TBP)、c-Jun、c-Fos等都有使用。对于膜蛋白检测,常用的内参抗体是Na,K ATP酶。对于线粒体蛋白的检测,VDAC1和COX IV通常用作内参抗体
本文到此结束,希望对大家有所帮助。
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